目錄:和元李記(上海)生物技術有限公司>>細胞生物學>>細胞染色>> AC18L032Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽(綠色)
CAS | / | 純度 | / |
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分子量 | / | 分子式 | / |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 300 T |
貨號 | AC18L032 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
主要用途 | 染色反應特異性強,對比性高,適合用作F-actin的定性和定量檢測。 |
產品描述
鬼筆環(huán)肽是從一種菌類Amanita Dhalloides所提取出來的環(huán)肽。它與F-actin競爭性的結合。熒光標記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結合并且易溶于水,為檢測組織切片,培養(yǎng)細胞和無細胞體系中的actin的定位和定量提供了非常方便的標記方法。
本品為Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽(綠色),可發(fā)出高亮度、穩(wěn)定的綠色熒光,染色反應特異性強,對比性高,適合用作F-actin的定性和定量檢測。與Actin抗體比較,Alexa Fluor 488鬼筆環(huán)肽具有如下優(yōu)點:(1)與actin亞單位一比一結合,并且不與G-actin結合,具有比Actin抗體更好的染色效果。(2)且本品的結合沒有物種差異性,適用性廣泛。(3)鬼筆環(huán)肽標記的非特異性信號可忽略,因而圖像的反差較好。(4)染色與用于細胞分析的其他熒光染色*兼容,包括熒光蛋白、Qdot® 納米晶體和其他Alexa Fluor偶聯(lián)物(包含Alexa Fluor偶聯(lián)二抗)。(5)經本品結合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學特性。
技術資料
1. Ex(nm):493
2. Em(nm):517
3. 分子量:1900
4. 溶劑:DMSO
5. 結構式:
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽 (綠色) | AC18L032 | 300 T | 2280 |
保存方法
冰袋運輸,收到貨后可按需分裝,并于-20℃避光干燥保存,避免反復凍融。1年有效。
使用方法
1. 準備1× Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽工作液
吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽存儲液到1 mL 含有1%BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。
【注】:不同的細胞染色后情況不同,相應Alexa Fluor488鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。
2. 細胞染色步驟
(1)細胞培養(yǎng)過夜或更長,使其密度達到50~60%匯合度。
(2)吸掉培養(yǎng)液,37℃預熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞2次。
(3)使用含有3-4%甲醛的PBS溶液進行細胞固定,室溫固定10~30 min。
【注】:避免固定劑中含有甲醇成分,因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。
(4)室溫條件下,用PBS清洗固定好的細胞2~3次,每次10 min。
(5)(可選):室溫條件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3~5 min,從而增加其通透性。
【注】:鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細胞,一般情況下不需對細胞進行冷丙tong和TRITON X-100處理。
(6)室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10 min。
(7)每孔加入 Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽工作液100 μL /孔(96孔板),室溫避光染色20~90 min,夏季時間相對短些。
(8)用PBS清洗細胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽。
(9)(可選):加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復染,如:100 μL /孔(96孔板),室溫3~5 min。用PBS清洗細胞2次,每次5 min。
(10)于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察,選擇Alexa FluorTM 488激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=493/517nm)和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。