產(chǎn)品介紹:
名稱 大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞 2.組織來源:肺小動脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺小動脈組織;小動脈(smallartery),管徑在0.3~1mm之間,小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以*閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細(xì)血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R321 換液頻率每2-3天換液一次; 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
細(xì)胞特點及處理:
產(chǎn)品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 |
使用方法:
收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。 2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 3. 細(xì)胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。 |
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
GAP43 / Neuromodulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PLXDC1 / TEM3 / TEM7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRXN3 / Neurexin-3-beta 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
VSIG2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TNFRSF13B / TACI / CD267 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MIF / GLIF 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ST6GAL1 / SIAT1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞蘇丹Ⅳ AR松節(jié)油 ARAnti-ISR- Alpha /FITC(Insulin Receptor- Alpha) 熒光素標(biāo)記胰島素受體抗體
蘇丹Ⅳ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析松節(jié)油 藥用級Anti-ISR- Alpha protein/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體-α蛋白抗體IgG
硅鎢酸,二十六水 AR鋅,七水 AR,99.5%Anti-ISR- Beta /FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體-β抗體IgG
蘇丹II Biological stain氫氧化 電子級, 99.99% metals basis,鈉除外Anti-ISR- Alpha protein/RBITC 羅丹明標(biāo)記胰島素受體-α 抗體IgG
蘇丹II 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析,≥94.5% (HPLC)氫氧化標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1000mol/L(0.1N)Anti-Integrin- Alpha 4/FITC 熒光素標(biāo)記整合素α4抗體IgG
蘇丹II 90%氫氧化 電子級,50%溶液Anti-Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 熒光素標(biāo)記整合素αV抗體IgG
碳酸鍶 99.95% metals basis氫氧化 AR,90%Anti-Integrin AlphaV /FITC 熒光素標(biāo)記巨噬來源的趨化因子αV抗體IgG
水楊基熒光酮 AR氫氧化 ACSAnti-Integrin- Beta3/ITG- Beta3/CD61/FITC 熒光素標(biāo)記整合素-β3抗體IgG
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