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小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2022-04-22 16:04:43瀏覽次數(shù):228

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X1288 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞的相關(guān)*:豬凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬腦鈉素(BNP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)免疫試劑盒*直銷
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品介紹:

名稱    小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

2.組織來(lái)源:椎間盤組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶,后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3,其外層的細(xì)胞呈梭型,主要屬于纖維細(xì)胞,內(nèi)層細(xì)胞呈圓形,主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),它們的核較圓,核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級(jí)深酶體和次級(jí)深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱,椎間盤開(kāi)始退變。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞經(jīng)型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M204

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳3-5代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1288

細(xì)胞特點(diǎn)及處理:

產(chǎn)品特點(diǎn):

1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2

 

細(xì)胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng):

1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。

4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。

4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml

5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。

 

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

 MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 PKC nu / PRKD3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 TRIB2 / TRB2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CNDP2 / CPGL / PEPA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 VEGF121 / VEGF-A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞泛素載體蛋白L6抗體Anti-LMO2 Antibody人腦血管平滑肌品牌

泛素激活2H抗體Anti-LONP1 Antibody人臍靜脈平滑肌說(shuō)明書

泛素蛋白連接G1抗體Anti-LMTK3 Antibody人絨毛間充質(zhì)成纖維品牌

泛素蛋白連接E1抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody人間充質(zhì)干-脂肪品牌

泛素蛋白連接E3抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody小鼠神經(jīng)干說(shuō)明書

泛素蛋白連接2E2抗體Anti-LOX Antibody人臍動(dòng)脈平滑肌品牌

泛素蛋白連接D4抗體Anti-LOXL2 Antibody人少突膠質(zhì)品牌

泛素蛋白連接D3抗體Anti-LOR AntibodymCF, 小鼠心臟成纖維說(shuō)明書

 


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