化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1297 |
商品介紹：
名稱 小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞 2.組織來源：腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞分離腦組織；多巴胺神經(jīng)元，即：胺能神經(jīng)元，主要指含多巴胺的神經(jīng)元，其細(xì)胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機(jī)體內(nèi)合成時以酪氨酸為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細(xì)胞來合成，這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動，與軀體運(yùn)動機(jī)能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時，可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine)，是NA的前體物質(zhì)，是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響，神經(jīng)末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用，以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的神經(jīng)原物質(zhì)多巴胺(Dopamine)，則直接影響人們的情緒。從理論上來看，增加這種物質(zhì)，就能讓人興奮，但是它會令人上癮。多巴胺在前腦和基底神經(jīng)節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn)，基底神經(jīng)節(jié)負(fù)責(zé)處理恐懼的情緒，但由于多巴胺的緣故，取代了恐懼的感覺，因此有很多人的上癮行為，都是因多巴胺而起的。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)TH免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M207 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 GPT1 / GPT 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MAPKAPK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ACY1 / Aminoacylase-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SPG21 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
VEGF / VEGFA / VEGF165 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AKT3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SDF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞周期素M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人肺癌標(biāo)志物DR-70（DR-70TM）ELISA試劑盒,DR-70TM ELISA kit
周期素T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人乙酰肝素（HPA）ELISA試劑盒,HPA ELISA kit
周期素K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人抗存活素抗體/生存蛋白（Surv）ELISA試劑盒,Surv ELISA kit
抗肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒,EMA IgA ELISA
5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人衣原體蛋白樣活性因子（CPAF）ELISA試劑盒, CPAF ELISA
4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人流感病抗體IgG（FLU）ELISA試劑盒,FLU ELISA
4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人雌受體（ER）ELISA試劑盒,ER ELISA
4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人3-羥基-3-甲基戊二酰輔A合1（HMGCS1）ELISA試劑盒,HMGCS1 ELISA
化工儀器網(wǎng)