詳細介紹
產品介紹:
名稱 小鼠陰道壁成纖維細胞 2.組織來源:陰道組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠陰道壁成纖維細胞分離自陰道組織;陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路,也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層,即黏膜層、肌層和外膜。1)黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚,為復層鱗狀上皮,從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2)肌層由平滑肌組織構成,肌束排列不規則,縱行和環形互相交錯。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環形的橫紋肌稱括約肌。3)外膜層為纖維膜,由結締組織構成,內含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層,成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠陰道壁成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R325 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳2-3代左右;2代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 小鼠陰道壁成纖維細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X1416 |
細胞特點及處理:
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。
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使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養; 4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。 |
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