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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠牙髓干細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1411 |
商品介紹：
名稱 大鼠牙髓干細胞 2.組織來源：牙髓組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠牙髓干細胞分離自滑膜組織；牙髓組織位于牙齒內部的牙髓腔內。牙髓腔的外形與牙體形態大致相似，牙冠部髓腔較大，稱髓室，牙根部髓腔較細小，稱根管，根尖部有小孔，稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經、血管，淋巴和結締組織，還有排列在牙髓外周的造牙本質細胞，其作用是造牙本質。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異，出現不同的病理變化，在臨床上會表現為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續時間較長后，轉化為急性牙髓炎癥。間充質干細胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源于胚胎時期的中胚層組織，具有很強的自我復制和多向分化潛能，具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力，運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠牙髓干細胞采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠牙髓干細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R315 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
G-CSFR / CD114 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CHODL / CHOndrolectin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD6 / TP120 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD33 / Siglec-3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD300A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Ca10 / Car10 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠牙髓干細胞Escherichia coliβ位淀粉樣前體蛋白裂解1檢測試劑盒
Escherichia coli酮戊二酸檢測試劑盒
Escherichia coliEB病抗體檢測試劑盒
Escherichia coliα淀粉檢測試劑盒
Escherichia coli膽囊收縮素;縮膽囊素八肽檢測試劑盒
Escherichia coli卵清蛋白檢測試劑盒
Escherichia coli高遷移率族蛋白B1-IgG抗體檢測試劑盒
Escherichia coli高遷移率族蛋白B1-IgM抗體檢測試劑盒
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