詳細(xì)介紹
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。 2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 3. 細(xì)胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。 |
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) | GOY-01X1400 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞 2.組織來源:牙齦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦表面為復(fù)層鱗狀上皮,有角化層或不全角化層。上皮釘較長(zhǎng),伸入結(jié)締組織。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分,而且也轉(zhuǎn)向內(nèi)側(cè),覆蓋齦溝壁稱為溝內(nèi)上皮;一部分附著在牙體上稱為結(jié)合上皮。牙齦的固有層為各種方向交織的結(jié)締組織纖維束,其中最主要的成分是膠原纖維,它占全部結(jié)締組織56%。牙齦中為數(shù)最多的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞,肥大細(xì)胞也常在牙齦中出現(xiàn),此外還有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M310 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞特點(diǎn)及處理:
產(chǎn)品特點(diǎn): 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。
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下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
IGFBP7 / IBP-7 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 VNN1 / Vanin-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RGMA 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠牙齦成纖維細(xì)胞雌受體α抗體Human MCF2L (Guanine nucleotide exchange factor DBS) ELISA KIT人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒, TSA ELISA kit
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體Human RPIA(Ribose-5-phosphate isomerase) ELISA Kit人抗中性粒抗體(ANA)ELISA試劑盒, ANA ELISA kit
Ephrin A2抗體Human MXI1 (Max-interacting protein 1) ELISA KIT人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒,
大腸埃希體蛋白抗體Human MTCP1 (Protein p13 MTCP-1) ELISA KIT大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒,
雌轉(zhuǎn)移抗體Human MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) ELISA KIT巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
E Tag標(biāo)簽抗體Human ACADM (Medium-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KITWORT 瓊脂用于真,特別是酵母的計(jì)數(shù)和增培養(yǎng)(Merck方法)
登革熱病包膜糖蛋白E抗體Human MKKS (McKusick-Kaufman/Bardet-Biedl syndromes putative chaperonin) ELISA KIT麥 康凱瓊脂 用于腸道致病的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)
食道癌相關(guān)基因抗體Human MC1R (Melanocyte-stimulating hormone receptor) ELISA KITβ-