大鼠氣管軟骨細胞的相關(guān)*：小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒*直銷
小鼠免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒進口、組裝

冷凍保存細胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品屬性：   

商品介紹：

 

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 MAG / GMA / Siglec-4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 VSTM1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 VSTM1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 APOA1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 CCDC134 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 GBP1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 VCL / Vinculin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 NGFR / P75 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠氣管軟骨細胞鋅指蛋白300(抗原)Anti-GMFB Antibody大鼠組織蛋白B（CTSB）elisa定量檢測試劑盒

鋅指脂蛋白-1a(抗原)Anti-GM-CSF(CSF2) Antibody大鼠角蛋白18（CK-18/KRT18）elisa定量檢測試劑盒

鋅指脂蛋白-1b(抗原）Anti-GMFG Antibody大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域激2（Tie-2）elisa定量檢測試劑盒

人鋅指脂蛋白-1c(抗原)Anti-GNA14 Antibody大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）elisa定量檢測試劑盒

干擾素-γ多肽抗原（大、小鼠）Anti-GNAI3 Antibody大鼠畸胎瘤源性生長因子1（TDGF1）elisa定量檢測試劑盒

干擾素-β抗原Anti-GNA14 Antibody大鼠生長分化因子6（GDF6）elisa定量檢測試劑盒

干擾素-β抗原Anti-GNAL Antibody大鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1（SIRT1）ELISA kit

前列腺干抗原Anti-GNAT1 Antibody大鼠垂體腺苷酸環(huán)化激活肽27環(huán)化激活肽27（PACAP-27）elisa定量檢測試劑盒