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小鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2022-04-24 10:32:15瀏覽次數(shù):216

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X1391 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)*:小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠皮質(zhì)醇(Cortisol)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
小鼠牛小腸堿性(CIAP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠凝血因子X(jué)III B(F13B)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
小鼠凝血因子X(jué)III A1(F13A1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

小鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1391

商品介紹:

名稱    小鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 

 

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 ASGPR1 / ASGR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CTSZ 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 CD14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

IgG-Fc (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 IgG3-Fc 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 IgG2b-Fc 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 IgG2a-Fc 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 IgG4-Fc (108 Ser/Pro) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞抗體Anti-PRKCB Antibodycarlinoside59952-97-5說(shuō)明書(shū)

胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體Anti-PRKCD Antibody番茄紅素502-65-8說(shuō)明書(shū)

受體4抗體Anti-PRKCD Antibody丹皮甙72520-92-4價(jià)格

Smad4抗體Anti-PRKCE Antibodydimethylcurcumin52328-98-0價(jià)格

Smad7抗體Anti-PRKCE Antibody(原貨號(hào)PB0357)苦玄參苷IV184288-35-5品牌

Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體Anti-PRKCH Antibody烏藥烯26146-27-0規(guī)格

前列腺跨膜上皮1抗原抗體Anti-PRKCG Antibody藍(lán)萼香茶菜甲素79498-31-0價(jià)格

雌調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-PRKCH Antibody(原貨號(hào)PB0591)二氫白屈菜紅堿6880-91-7價(jià)格

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