詳細(xì)介紹
腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
2,4-二氯-6,7-二甲氧喹唑啉分子式:259.09分子量: C10H8Cl2N2O2英文名稱:2,4- two, -6,7- two, aCAS號:27631-29-4
錳粉/錳片分子式:54.94分子量: Mn英文名稱:Manganese powder / manganese tabletCAS號:7439-96-5
梔子甙英文名稱:GardeniaCAS號:24512-63-8分子式:388.37分子量:C17H24O10
2-巰并咪唑分子式:150.2分子量: C7H6N2S英文名稱:2- mercaptobenzimidazolesCAS號:583-39-1
氯五氨氯合鈷(III)分子式:250.44分子量: Cl3CoH15N5英文名稱:Five ammonia chloride (III)CAS號:13859-51-3
3-吲哚丁英文名稱:3- of theCAS號:133-32-4分子式:203.24分子量: C12H13NO2
4-甲酰-1-甲吡磺酸鹽分子式:279.31分子量: C13H13NO4S英文名稱:4- a group of -1-CAS號:82228-89-5
性紅1英文名稱:Acid red 1CAS號:3734-67-6分子式:509.42分子量: C18H13N3Na2O8S2
α,α,α-三聯(lián)吡分子式:233.27分子量: C15H11N3英文名稱:Alpha, alpha, tripleCAS號:1148-79-4
辛醛英文名稱:Xin XiquanCAS號:2548-87-0分子式:126.2分子量: C8H14O
3-甲氧吡分子式:109.13分子量: C6H7NO英文名稱:3- methyl groupCAS號:7295-76-3
腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒方法Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Unrip/STRAP 絲氨酸/蘇氨酸激酶受體相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
NRIP 雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體(核受體相互作用蛋白) 0.2ml
PTPN7/HePTP 非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體 0.2ml
SLC27A5 脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白5抗體 0.2ml
HEATR7B2 熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體 0.2ml
Donkey Anti-human IgG 驢抗人IgG 1mg
SREBP-2 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
PAK1 p21激活激酶1抗體 0.1ml
NGN3/Neurogenin 3 神經(jīng)元素3抗體 0.1ml
MYBPC3 心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
ABHD5 自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。