詳細(xì)介紹
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
燈盞花乙素英文名稱:Flower BCAS號:27740-01-8分子式:462.37分子量:C21H18O12
匹多莫德英文名稱:Pi do MaudeCAS號:121808-62-6分子式:244.27分子量: C9H12N2O4S
氟洛芬英文名稱:FluparoxanCAS號:76639-94-6分子式:358.21分子量: C12H14Cl2FNO4S
醋胺硝唑分子式:187.18分子量: C5H5N3O3S英文名稱:Ammonium acetateCAS號:140-40-9
1-氟-3--5-硝分子式:267分子量: C6H3FINO2英文名稱:1- -5- -3-CAS號:3819-88-3
N-乙-N-(2-羥-3-磺丙)-3-鈉鹽(TOOS)英文名稱:N- ethyl -3- (2- hydroxy -3-) -N- methyl aniline sodium (TOOS)CAS號:82692-93-1分子式:331.4分子量: C12H18NNaO4S·2H2O
阿那曲唑分子式:293.37分子量: C17H19N5英文名稱:阿那曲唑CAS號:120511-73-1
鄰三聯(lián)分子式:230.3分子量: C18H14英文名稱:Adjacent threeCAS號:84-15-1
圣草次苷英文名稱:Time of StCAS號:13463-28-0分子式:596.53398分子量:C27H32O15
2,4-二氟甲分子式:128.12分子量: C7H6F2英文名稱:2,4- two fCAS號:452-76-6
1,4,7,10-四叔丁二萘嵌分子式:476.73分子量: C36H44英文名稱:1,4,7,10- tert butyl two ryleneCAS號:677275-33-1
腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒方法ICAM4/CD242 細(xì)胞間粘附分子4抗體 0.2ml
Bik 促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml
KCNN4 鈣激活鉀通道蛋白4抗體 0.1ml
APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
SEPT10 細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體 0.2ml
phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml
NDUFS4 線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白抗體 0.2ml
IL-18/IGIF 白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml
MCC 大腸癌腫瘤突變蛋白抗體 0.2ml
UPP1/Uridine Phosphorylase 1 尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗體 0.2ml
FBXO24 FBXO24蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。