詳細介紹
札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
聚乙英文名稱:PECAS號:9002-88-4分子式:分子量: [C2H4]n
萘酚AS-TR乙酯英文名稱:Naphthol AS-TR acetateCAS號:86875587分子式:分子量:
富勒C60(純)英文名稱:Fullerene C60 (pure)CAS號:99685-96-8分子式:720.66分子量: C60
癸二酰分子式:230.31分子量: C10H22N4O2英文名稱:Decyl two hydrazideCAS號:925-83-7
氟硅酸鉀分子式:220.27分子量: K2SiF6英文名稱:Potassium fluorideCAS號:16871-90-2
9-(3-溴)咔唑分子式:322.21分子量: C18H12BrN英文名稱:9- (3- Bromophenyl) carbazoleCAS號:185112-61-2
4-(4-溴胺)聯(lián)分子式:324.22分子量: C18H14BrN英文名稱:4- (4-)CAS號:1160294-93-8
8-溴喹哪分子式:222.09分子量: C10H8BrN英文名稱:8-, which isCAS號:61047-43-6
4--3-吡分子式:220.01分子量: C5H5IN2英文名稱:4- amino -3-CAS號:88511-27-7
甲紅英文名稱:Methyl redCAS號:493-52-7分子式:269.3分子量: C15H15N3O2;(CH3)2<
4-甲喹啉分子式:143.19分子量: C10H9N英文名稱:4- methyl groupCAS號:491-35-0
札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒方法Goat Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
CD8 CD8抗體 0.1ml
phospho-PRKD1(Ser738) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 0.1ml
DOK1 D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml
OPN/BSP 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人 0.1ml
CD22/BLCAM B淋巴細胞粘附分子CD22抗體 0.1ml
Bif Bax相互作用因子1抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
SOD1/SOD 超氧化物歧化酶1抗體(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD) 0.1ml
VEGF-C 血管內(nèi)皮生長因子C型抗體 0.1ml
Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。