詳細(xì)介紹
諾沃克病毒(NV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
諾沃克病毒(NV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
諾沃克病毒(NV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
三氯噠唑分子式:359.66分子量: C14H9Cl3N2OS英文名稱(chēng):Three.CAS號(hào):68786-66-3
鉀分子式:138.55分子量: KClO4英文名稱(chēng):Potassium perchlorateCAS號(hào):7778-74-7
聯(lián)芐唑分子式:310.4分子量: C22H18N2英文名稱(chēng):Of theCAS號(hào):60628-96-8
4-(1-吡咯烷)分子式:154.25分子量: C9H18N2英文名稱(chēng):4 - (1- pyrrolidine) piperidineCAS號(hào):1133904
5--4-溴-3-甲吡唑.氫酸鹽分子式:256.93分子量: C4H7Br2N3英文名稱(chēng):5- amino -4- bromo -3- dimethylpyrazole hydrobromide.CAS號(hào):167683-86-5
1,1'-二庚-4,4'-二溴聯(lián)吡鎓分子式:514.39分子量: C24H38Br2N2英文名稱(chēng):1,1'- two -4,4'- heptyl bromide with pyridiniumCAS號(hào):1555692
異補(bǔ)骨脂查爾酮英文名稱(chēng):ISO bavachalconeCAS號(hào):分子式:分子量:
茜素綠英文名稱(chēng):Alizarin greenCAS號(hào):4403-90-1分子式:622.58分子量: C28H20N2Na2O8S2
6-氯喹林分子式:163.6分子量: C9H6ClN英文名稱(chēng):6- Lin chloroquineCAS號(hào):612-57-7
5-溴-2-氟三氟甲分子式:243分子量: C7H3BrF4英文名稱(chēng):5- -2- three fCAS號(hào):393-37-3
1-(氯甲)-4-硝分子式:171.58分子量: C7H6ClNO2英文名稱(chēng):-4- (1-) nitrobenzeneCAS號(hào):100-14-1
諾沃克病毒(NV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片Nicastrin 老年性癡呆蛋白APH2抗體 0.1ml
RNF35 環(huán)指蛋白35抗體 0.2ml
COX7A2 細(xì)胞色素c氧化酶VIIA亞型2抗體 0.1ml
HRAS/Ras/Ras p21 原癌基因H-ras抗體 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
SODD Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.5ml
Glutamine PRPP amidotransferase 谷氨酰胺磷酸核糖基焦磷酸酰胺基轉(zhuǎn)移酶 0.2ml
phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體 0.1ml
ADCY2 腺苷酸環(huán)化酶2抗體 0.2ml
IGF2BP2/IMP2 胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。