詳細(xì)介紹
鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
3-氯-4-吡分子式:138.55分子量: C6H3ClN2英文名稱:3- chloro -4- cyanopyridineCAS號(hào):68325-15-5
它勃寧英文名稱:It 40CAS號(hào):4429-63-4分子式:336.43分子量:C21H24N2O2
(R,R)-(+)-2,2'-異亞丙雙(4-叔丁-2-惡唑啉)分子式:294.44分子量: C17H30N2O2英文名稱:(R, R) - (+) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)CAS號(hào):131833-97-1
6,7-二甲氧豆素英文名稱:6,7- two aCAS號(hào):120-08-1分子式:206.1947分子量:C11H10O4
2-溴-3-硝吡分子式:202.99分子量: C5H3BrN2O2英文名稱:2- -3- nitro pyridineCAS號(hào):19755-53-4
3--4-甲氧三氟甲分子式:191.15分子量: C8H8F3NO英文名稱:3- amino -4- three fCAS號(hào):349-65-5
2-(甲氨)三氟甲分子式:175.15分子量: C8H8F3N英文名稱:2- (methyl ammonia) three fCAS號(hào):14925-10-1
6-甲氧-2-乙酰萘分子式:200.23分子量: C13H12O2英文名稱:6- a -2- acetyl naphthaleneCAS號(hào):3900-45-6
細(xì)胞染色劑黃綠素-AM英文名稱:Cell stain calcein -AMCAS號(hào):148504-34-1分子式:994.857分子量: C46H46N2O23
氯木蘭花堿英文名稱:Chlorinated MagnoliaCAS號(hào):分子式:377.86186分子量:C20H24ClNO4
天青A英文名稱:Azure ACAS號(hào):37247-10-2分子式:625.68分子量: C16H18N3S · C15H1<
鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒方法CCL17/ABCD2 胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 0.1ml
Adenylate kinase 2/AK2 腺苷酸激酶1抗體 0.2ml
FMDV Polyprotein (VP1 protein) 口蹄疫病毒A型抗體(N端) 0.2ml
MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R 褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 0.1ml
IL-2 白介素2抗體 0.2ml
LIMS1 整合素和生長因子樣蛋白1抗體 0.1ml
TXNRD1 硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體 0.2ml
HURP/DAP5 肝癌上調(diào)蛋白抗體 0.2ml
FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體 0.2ml
phospho-ATXN1(Ser775) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 0.1ml
NANOGP8 干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
C19orf46 19號(hào)染色體開放閱讀框46抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。