詳細介紹
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
1-乙酰咪唑分子式:110.11分子量: C5H6N2O英文名稱:1- acetylCAS號:2466-76-4
鄰二氯分子式:147分子量: C6H4Cl2英文名稱:Adjacent twoCAS號:95-50-1
酒石酸銻鉀分子式:667.87分子量: C8H10K2O15Sb2英文名稱:Antimony potassium antimonyCAS號:28300-74-5
5-硝水醛英文名稱:5- nitro groupCAS號:97-51-8分子式:167.12分子量: C7H5NO4
1,3-雙(4-甲氧氧)分子式:322.36分子量: C20H18O4英文名稱:1,3- bis (4-) benzeneCAS號:13118-91-7
曙紅B英文名稱:Eosin BCAS號:548-24-3分子式:624.06分子量: C20H6N2O9Br2Na2
二甲酚藍英文名稱:Xylene phenol blueCAS號:125-31-5分子式:410.48分子量: C23H22O5S
2-氯-5-氟硝分子式:175.54分子量: C6H3ClFNO2英文名稱:2- chloride -5-CAS號:345-17-5
2-(2-噻吩)吡分子式:161.22分子量: C9H7NS英文名稱:2- (2-) pyridineCAS號:3319-99-1
4-二甲吡(DMAP)分子式:122.17分子量: C7H10N2英文名稱:4- two (DMAP)CAS號:1122-58-3
4-甲酸分子式:129.16分子量: C6H11NO2英文名稱:4- piperidine formic acidCAS號:498-94-2
蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測試劑盒方法phospho-MEK5(Ser142) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 0.1ml
Integrin alpha E2 整合素alpha E2 抗體 0.1ml
DHPS 脫氧輔合酶蛋白抗體 0.2ml
phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-Met抗體 0.1ml
BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 腺病毒5結合蛋白BS69抗體(骨形態發生蛋白受體相關分子1) 0.2ml
Phospho-Rb(Ser788) 磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 0.1ml
BTBD17 BTB/POZ結構域蛋白17抗體 0.2ml
IL-17B 白介素-17B抗體 0.1ml
SA1/Nuclear protein stromal antigen 1 粘結蛋白SA1抗體 0.2ml
BAFF/CD257 TNF家族B細胞激活因子抗體 0.2ml
PRX/periaxin 軸周蛋白PRX抗體 0.1ml
DOK6 胞漿接頭蛋白Dok6抗體 0.2ml