詳細介紹
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當的其他形狀)的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱 | 規格 | 分類 |
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
二甲亞砜-13C2分子式:80.15分子量: C2H6OS英文名稱:Two methyl -13C2CAS號:136321-15-8
4-(二氟溴甲)溴分子式:分子量:英文名稱:4- (Xiu Jiaji - two f)CAS號:2358-32-9
7-氯-4-羥-2-甲喹啉分子式:193.63分子量: C10H8ClNO英文名稱:7- -4- hydroxy -2- methyl groupCAS號:15644-88-9
4-溴-3-硝三氟甲分子式:270分子量: C7H3BrF3NO2英文名稱:4- -3- nitro threeCAS號:349-03-1
4,5-二氟酞腈分子式:164.11分子量: C8H2F2N2英文名稱:4,5- two fluorine phthalocyanineCAS號:134450-56-9
并四咪唑分子式:252.34分子量: C15H12N2S英文名稱:并四咪唑CAS號:885051-07-0
1-氯甲萘分子式:176.64分子量: C11H9Cl英文名稱:1- methyl naphthaleneCAS號:86-52-2
重酸氫鉀分子式:389.91分子量: KHI2O6英文名稱:Potassium hydrogen carbonateCAS號:13455-24-8
溴代十六烷吡分子式:384.44分子量: C21H38BrN英文名稱:Bromine sixteen alkyl pyridineCAS號:140-72-7
4,4'-二乙炔聯分子式:202.26分子量: C16H10英文名稱:4,4'- two acetylene baseCAS號:38215-38-2
3--5-甲吡分子式:118.14分子量: C7H6N2英文名稱:3- cyano -5- methyl pyridineCAS號:42885-14-3
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒方法SPHK1 鞘氨醇激酶1抗體 0.2ml
phospho-RPS6KA1(Ser363) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
Metronidazole(1C2) 甲硝唑單克隆抗體 0.2ml
GADD45 gamma 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 0.2ml
phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥苷酸調節蛋白12抗體 0.1ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒酶調節相關蛋白抗體 0.1ml
C15orf52 15號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
C3a Receptor/C3aR 過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 0.2ml
S100A6BP/CACYBP 鈣周期素結合蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Zap-70(Tyr493) 磷酸化zeta相關蛋白70抗體 0.1ml
Layilin 透明質酸受體抗體 0.1ml
HSP47 熱休克蛋白-47抗體 0.1ml
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。