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重組肝炎肝素酶III蛋白，CF

6145-GH

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窗體頂端

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重組肝素肝素酶III蛋白，CF摘要

1純度  

> 95％，通過在還原條件下進(jìn)行SDS-PAGE并通過膠體考馬斯藍(lán)染色以每泳道5μg的方式觀察。

2內(nèi)毒素水平

通過LAL方法，每1μg蛋白質(zhì)<1.0 EU。

3活動

通過其從肝素中釋放寡糖的能力來衡量。在所述條件下測得的比活度＞ 3,000pmol / min /μg。

4資源

大腸桿菌來源的p。肝素肝素酶III蛋白
Gln25-Pro659，具有N-末端Met和6-His標(biāo)簽

5登記號 AAB18278

6 N端序列分析 大都會

7預(yù)測分子量 74 kDa

8 SDS頁面66 kDa，還原條件

產(chǎn)品數(shù)據(jù)表

無載體

CF是什么意思？

CF代表無載體（CF）。我們通常將牛血清白蛋白（BSA）作為載體蛋白添加到我們的重組蛋白中。添加載體蛋白可增強(qiáng)蛋白穩(wěn)定性，延長保質(zhì)期，并使重組蛋白以更稀的濃度存儲。運(yùn)營商免費(fèi)版不包含BSA。

什么配方適合我？

通常，我們建議購買帶有BSA的重組蛋白，用于細(xì)胞或組織培養(yǎng)，或作為ELISA標(biāo)準(zhǔn)。相反，建議將無載體蛋白質(zhì)用于BSA的存在可能會干擾的應(yīng)用。

6145-GH

測定步驟

用料

• 分析緩沖液：50 mM Tris，2 mM CaCl ₂，pH 7.5
• 重組P. heparinus肝素酶III（R P. heparinus肝素酶III）（目錄號＃6145-GH）
• 底物：肝素（Tocris，目錄號2812），去離子水中儲備20 mg / mL
• 96孔透明的紫外線透明微孔板（Corning，目錄號3635）
• 酶標(biāo)儀（型號：Molecular Devices的SpectraMax Plus）或同等產(chǎn)品

1. 稀? P. heparinus肝素酶III0.5納克/μL在測定緩沖液。
2. 在測定緩沖液中將底物稀釋1.5 mg / mL。
3. 負(fù)荷成板100μL稀釋的為r的P. heparinus肝素酶III，并開始加入的1.5毫克/毫升基板200μL反應(yīng)。包括一個(gè)包含100 µL測定緩沖液和200 µL 1.5 mg / mL底物的底物空白。
4. 在動力學(xué)模式下以232 nm的吸光度讀數(shù)5分鐘。
5. 計(jì)算比活動：

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*針對基板空白進(jìn)行調(diào)整  
     **使用消光系數(shù)3800 M ^-1 cm ^-1 
     ***使用光程校正0.92 cm 
     注意：許多分光光度計(jì)的輸出均為mOD。每口井：

• r P. heparinus肝素酶III：0.05 µg
• 底物：1.0 mg / mL

在室溫下，通過監(jiān)測232 nm的吸光度，在5分鐘的動力學(xué)分析中評估肝素硫酸鹽（200μg）的肝素酶III消化率。R＆D Systems重組肝菌肝素酶III（產(chǎn)品目錄號6145-GH）（橙色）比競爭類桿菌肝素酶III（綠色）具有更大的活性。

重構(gòu)計(jì)算器

背景：肝素酶III

硫酸乙酰肝素是一種硫酸化的糖胺聚糖，具有重復(fù)的-4HexA1,4GlcNAcβ1-二糖單元。它通常附著在細(xì)胞膜和細(xì)胞外基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的蛋白聚糖的蛋白質(zhì)核心上，在那里它與各種蛋白質(zhì)配體結(jié)合并調(diào)節(jié)廣泛的生物活性（1、2）。硫酸乙酰肝素具有疇結(jié)構(gòu)，其中硫酸化區(qū)域與較少或未硫酸化的區(qū)域間隔開（3、4）。肝素與硫酸乙酰肝素共享主鏈結(jié)構(gòu)，但不包含非硫酸化區(qū)域。肝素酶是一類裂解酶，經(jīng)消化后會從肝素和硫酸乙酰肝素中釋放不飽和寡糖（5）。肝素酶I識別高度硫酸化的區(qū)域，對肝素更具特異性。肝素酶II消化肝素和硫酸乙酰肝素。

Entrez基因ID

8254931（P.肝素）

備用名

肝素酶III

產(chǎn)品列表如下：