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小白蛋白貓＃MCA-3C9的小鼠單克隆抗體

      小白蛋白是一種低分子量胞質(zhì)鈣結(jié)合蛋白，含有“ EF手鈣結(jié)合基序，是該亞類（1）中表征的第yi個(gè)蛋白質(zhì)。小白蛋白在快速收縮的肌肉，大腦和某些內(nèi)分泌組織中表達(dá)。在腦中，它尤其集中在分子層的Purkinje細(xì)胞和中間神經(jīng)元中，但在許多皮質(zhì)GABA能中間神經(jīng)元中也發(fā)現(xiàn)（1-3）。這些GABA能神經(jīng)元在大多數(shù)情況下僅表達(dá)三種鈣結(jié)合蛋白之一，即小白蛋白，鈣網(wǎng)蛋白或鈣結(jié)合蛋白。結(jié)果，這些中間神經(jīng)元可以根據(jù)它們?cè)谶@三種蛋白質(zhì)中的含量（4-6）進(jìn)行識(shí)別和分類。每種類型的中間神經(jīng)元都具有不同的電生理特性，因此，可以根據(jù)它們?cè)谶@三種蛋白質(zhì)中的含量來鑒定和分類不同類型的中間神經(jīng)元（7）。因此，針對(duì)小白蛋白的抗體是有用的細(xì)胞類型標(biāo)記物，與這種抗體一樣，它們不會(huì)與相關(guān)分子鈣網(wǎng)蛋白或鈣結(jié)合蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。EnCor還生產(chǎn)雞小白蛋白的多克隆抗體CPCA-Pvalb。我們還提供多種針對(duì)calbindin（MCA-9和CPCA-Calb）和calretinin（MCA-3G9，MCA-6A9和CPCA-Calret）的小鼠和雞抗體，可以對(duì)適當(dāng)?shù)募?xì)胞和組織樣品進(jìn)行兩次和三次標(biāo)記。鼠標(biāo)左移選擇圖像以獲得更大的視野。

 

大鼠小腦切片的免疫熒光分析，用小鼠mAb染色小白蛋白，MCA-3C9，稀釋度為1：1,000，綠色，并與雞pAb染色鈣結(jié)合蛋白，CPCA-Calb，稀釋度為1：2,000，紅色。藍(lán)色是核DNA的DAPI染色。用4％多聚甲醛對(duì)大鼠進(jìn)行心臟心臟灌注后，將大腦固定24小時(shí)，切成45μM，并用上述抗體將自由漂浮的切片染色。大多數(shù)浦肯野細(xì)胞強(qiáng)烈表達(dá)小白蛋白和鈣結(jié)合蛋白，因此呈黃色，而籃，星狀和高爾基細(xì)胞僅表達(dá)小白蛋白，因此呈綠色。

 

使用小鼠mAb對(duì)小白蛋白，MCA-3C9，以1：1,000的綠色稀釋度對(duì)骨骼肌溶解產(chǎn)物和His標(biāo)記的重組蛋白進(jìn)行Western印跡分析：[1]蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（紅色），[2]小鼠肌肉，[3]全長(zhǎng)人小白蛋白，[4]全長(zhǎng)人降鈣素和[5]全長(zhǎng)人降鈣素。正如預(yù)期的那樣，在肌肉裂解液中檢測(cè)到一條12kDa的條帶，在His標(biāo)記的重組小白蛋白蛋白泳道中檢測(cè)到一條18kDa的條帶，因?yàn)镠is-tag和其他載體衍生的序列使該分子增加了約6kDa。請(qǐng)注意，盡管MCA-3C9抗體具有相關(guān)的氨基酸序列，但它們與calbindin或calretinin均不交叉反應(yīng)。

 

名稱：    小鼠單克隆抗體小白蛋白

免疫原    在大腸桿菌中表達(dá)并純化的全長(zhǎng)重組人蛋白質(zhì)。

HGNC名稱： PVALB

分子量：       12kDa的

主辦：    鼠

同型：    IgG1

物種交叉反應(yīng)：    人，大鼠，小鼠，牛，豬，馬

RRID：   AB_2572372

格式：    在50％PBS，50％甘油和5mM NaN 3中的 1mg / mL純化抗體

應(yīng)用范圍：    WB，IF / ICC，IHC

推薦的稀釋液：    WB：1：1,000-1：5,000 ICC / IF或IHC：1：1,000-1：5,000

存儲(chǔ)：    在4°C穩(wěn)定一年，可在-20°C長(zhǎng)期保存

 

小鼠單克隆抗體髓鞘堿性蛋白

Cat＃MCA-7G7

髓磷脂堿性蛋白（MBP）是神經(jīng)系統(tǒng)中軸突周圍髓鞘的主要蛋白之一。由于分子量相對(duì)較低且豐度較高，因此30年前從純化的蛋白質(zhì)中確定了蛋白質(zhì)序列（1）。該蛋白質(zhì)由中樞和神經(jīng)系統(tǒng)中的少突膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，因此針對(duì)MBP的抗體是該細(xì)胞類型的良好標(biāo)記。在外周神經(jīng)系統(tǒng)中，MBP是由有髓的雪旺氏細(xì)胞表達(dá)的，因此該抗體可用于識(shí)別培養(yǎng)物或切片材料中的這些細(xì)胞。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，通過從單個(gè)基因交替轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的四種不同形式的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)產(chǎn)物在人體內(nèi)的分子量分別為21.5、20.5、18.5和17.2kDa。嚙齒動(dòng)物的單個(gè)基因也產(chǎn)生4種不同的蛋白質(zhì)，但是剪接機(jī)理不同，產(chǎn)生4種形式，大小略有不同，分別為21.5、18.5、17和14kDa。一些興趣集中在MBP作為多發(fā)性硬化癥小鼠模型（MS，3）和人類患者（4）中潛在的重要自身抗原上。檢測(cè)釋放到血液和腦脊液中的MBP有可能作為MS脫髓鞘和軸突丟失以及其他相關(guān)損害和疾病狀態(tài)的替代生物標(biāo)志物（例如5）。

MCA-7G7抗體是針對(duì)從牛腦中進(jìn)行生物化學(xué)純化的MBP制劑制備的。它可用于鑒定神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)物中的少突膠質(zhì)細(xì)胞和雪旺氏細(xì)胞，可視化切片材料中的髓鞘和髓鞘細(xì)胞，并檢測(cè)MBP基因產(chǎn)物的蛋白質(zhì)印跡。該抗體對(duì)醛固定也相當(dāng)不敏感，因此可用于石蠟切片的免疫組織化學(xué)。MCA-7G7抗體結(jié)合所有四個(gè)CNS MBP亞型，因此該抗體的表位位于所有四個(gè)基因產(chǎn)物共有的“核心”中。進(jìn)一步作圖將表位定位于肽TPPPSQGKG，即人21.5kDa序列的氨基酸125-133。用重疊的肽產(chǎn)生了數(shù)據(jù)，這表明后四個(gè)氨基酸SQGKG可能是表位的關(guān)鍵元素。該肽在大鼠，小鼠，牛和許多其他物種中是不變的，因此該抗體將具有廣泛的適用性。相反，我們的替代小鼠單克隆MCA-7D2僅與21.5kDa和18.5kDa大鼠MBP同種型結(jié)合，但與所有牛和人同種型結(jié)合，將表位映射AEGQRPGFGYGGRASDYKSAHKGFKGVDAQGTLSKIFKLG，即人21.5kDa序列的氨基酸145-184。可以從此處下載人和大鼠中四種CNS MBP同種型的序列比對(duì)。鼠標(biāo)左移選擇圖像以查看大圖，而“其他信息”選項(xiàng)卡上則選擇更多信息。

 

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