anatrace浙江試劑anatrace代北京試劑anatrace代天津試劑anatrace代吉林試劑anatrace代遼寧試劑anatrace代湖北試劑anatrace代湖南試劑anatrace代廣東試劑anatrace代浙江試劑anatrace代江蘇試劑anatrace代深圳試劑anatrace代陜西試劑anatrace代山西試劑代山東試劑anatrace代遼寧試劑anatrace天津試劑

北京華新康信年度推廣活動 anatrace上海試劑 anatrace湖北試劑 anatrace10280血漿對照 anatrace10280血漿對照 anatrace天津試劑 anatrace天津試劑

Anatrace活動價Anatrace活動價Anatrace活動價 Anatrace所有系列一站式采購 Anatrace檢測試劑盒 Anatrace檢測試劑盒 Anatrace放線菌類 Anatrace放線菌類胰蛋白 Anatrace江蘇試劑 Anatrace湖南試劑 Anatrace所有系列一站式采購Anatrace天津試劑 Anatrace所有系列一站式采購 anatrace天津試劑 anatrace天津試劑 anatrace上海試劑 anatrace上海試劑

聚合編號

膠束的另一個物理性質是聚集數；

存在于膠束內的洗滌劑單體的數量（1，25，30）

用于生化應用的大多數洗滌劑都具有聚集性

50到100之間的數字（8）有些膽汁是例外

酸衍生物，如CHAPS、CHAPSO和Big CHAP，具有

約10種洗滌劑的總數

聚集數往往形成更多的球形膠束，而

聚集數較大的洗滌劑往往形成橢圓體

膠束通常，聚集數隨著長度的增加而增加

碳氫化合物鏈的增加聚集數往往

隨著親水基團的大小增加而減小

向洗滌劑中添加碳氫化合物和極性化合物

溶液（1）提高離子威懾物溶液的溫度-

試劑也會導致聚集數量的增加Aggrega-

離子數可以通過多種方法確定，包括

光散射（43）、小角度中子散射（44）和熒光

染料結合（45）

了解洗滌劑CMC和聚集數，一個

可以確定幾個重要的參數，包括concen-

溶液中膠束的過濾和聚集分子

膠束的重量在理想的無蛋白質條件下，濃度-

膠束的離子可以計算如下：

[膠束]=[總洗滌劑]-[CMC]/AN（iii）

其中CMC是臨界膠束濃度，并且

AN是膠束聚集數

無蛋白質膠束的聚集分子量（AMW）可以

計算如下：

AMW=AN X單體分子量（iv）

其中AN是膠束聚集數

典型的膠束聚集體分子量范圍為20-100kD

6 8 0 0 .2 5 2 .1 2 8 0

應該注意的是，聚集體分子的測定

蛋白質-洗滌劑復合物的重量更為復雜

本出版物后面的內容參見“聚合分子量

蛋白質/洗滌劑復合物"，第7頁

清洗劑去除

CMC在確定應采用哪種方法時也很重要

用于去除多余或不需要的洗滌劑洗滌劑可能會-

fere與某些應用程序配合使用，并且在重新配置時必須刪除-

組成脂質體（46，47）具有高CMC的洗滌劑很容易

通過透析去除；洗滌劑溶液可以稀釋到低于

CMC，使膠束分解成單體，可以很容易地

隨著時間的推移通過透析管（7）通常，洗滌劑溶液-

在大量過量（即200倍）的洗滌劑的作用下對離子進行透析-

幾天的免費緩沖液，幾次更換無洗滌劑緩沖液

在這段時間內，CMC低的洗滌劑通常通過

對疏水性珠粒的吸附（48）洗滌劑結合珠粒可以

然后通過過濾或離心去除洗滌劑可以

也可以通過各種類型的柱色譜凝膠去除

過濾可用于將洗滌劑膠束與蛋白質分離-

基于尺寸差異的洗滌劑復合物和游離蛋白

組酸也可以去除或更換洗滌劑-

標記的蛋白質與鎳樹脂結合（7）

洗滌劑和生物膜

生物膜是磷脂分子的雙層；這個

雙層的總體結構如下圖所示（圖5）

脂質雙層的結構

圖5

脂質酰基鏈的尾部朝向彼此（產生

非極性疏水核），而極性磷酸酯頭

基團與周圍的主體水相接觸。因此，雙層

分為兩個不同的區域：疏水核心和

親水性頭部區域每個“隔間"都有特的

不同地影響駐留在

雙層雙層的疏水核心，由磷組成-

磷脂酰基鏈，約30?厚，并提供

疏水區溶劑化的低介電環境

整體膜蛋白的（49，50）這個區域通常相當

生物相關溫度下的流體；雙層流動性通常

蛋白質功能和蛋白質橫向擴散所必需的

親水性頭群區域通常是極性的并且帶電

該區域通過哥倫布力與膜蛋白相互作用

其穩定額外的膜環并與極性

α-螺旋末端（49，50）

生物膜相對于脂質和

蛋白質例如，脂質的組成不同

紅細胞膜的小葉有助于

這些細胞，允許它們通過脈管系統（外部

小葉：76%磷脂酰堿（PC）、82%鞘磷脂（SP），

20%磷脂酰乙醇胺（PE）、0%磷脂酰絲酸（PS）；

內葉：24%PC，18%SP，80%PE，100%PS百分比為o

總脂質含量）（51）此外，蛋白質可能優先

位于膜的內部或外部小葉上，以及

在優選的方向上，當

決定如何好地提取膜蛋白以及提取什么

條件（即洗滌劑和/或脂質）適合重構

用于生物化學研究

從膜中提取蛋白質

為了研究膜蛋白，必須首先從

膜，并保持在可溶性、天然、功能性的形式

在提取過程中，有人提出洗滌劑

單體首先分配到雙層中

洗滌劑與洗滌劑的協同作用破壞了雙層的穩定性

產生混合的脂質洗滌劑片段（圖6A）終，

進一步添加洗滌劑會導致雙層溶解和蛋白質

增溶作用（圖6B）（8，52）

膜的溶解性

圖6A

圖6B

膜蛋白可以有幾個“程度"

從膜中提取用于進一步研究蛋白質可以

以這樣的方式純化，使得一些天然脂質保持與

蛋白質這可以通過使用不

有效的脂質增溶劑，并通過小化

柱色譜期間的洗滌劑暴露或者，

蛋白質可以通過使用

嚴格的清潔劑這在以下應用中可能很重要

需要均勻的蛋白質制劑然后可以使用脂質

如果蛋白質活性需要，添加回這些制劑中

和/或穩定性

應該注意的是，研究

特殊的膜微結構域，稱為脂筏，存在

一個特的問題脂筏富含鞘脂，甘酸-

氧化磷脂和膽醇（53-55）這些結構域，也稱為

抗洗滌劑膜（DRM）已被證明

在細胞信號傳導和蛋白質分選中發揮關鍵作用歷上，DRM

通過其對冷溶解的抵抗力進行了檢測

Triton X-100然而，已經表明

其中的DRM取決于其

例如，Schuck等人表明

與DRMs相關的蛋白質和脂質的類型變化很大-

當使用不同的清潔劑來隔離膜時

域（53）因此，在選擇

從天然膜中分離蛋白質的合適洗滌劑

使用溶解的膜蛋白

一些更常見的洗滌劑已被證明是

在膜蛋白功能和結構研究中有用的是

烷基糖苷（56-58）例如，短鏈烷基麥芽糖苷和

葡萄糖苷已成功地用于膜的結晶

蛋白質（59-63），而長鏈糖苷（即十二烷基麥芽糖-

side、十四烷基麥芽糖苷和十六烷基麥芽糖苷）

顯示穩定偶聯的G蛋白的各種寡聚狀態

受體（GPCR），視紫紅質（64）十二烷基麥芽糖苷，例如，具有

被用于結晶膜蛋白細胞素c oxi-

來自球形紅桿菌（65）的酶，以研究

4-跨膜螺旋蛋白DsbB

大腸桿菌（66），并研究光誘導的mam結構變化-

用19F NMR測定馬里視紫紅質（67）

在膜中使用越來越多的其他清潔劑

蛋白質生物化學是溶血磷脂、Fos堿等-

試劑和短鏈磷脂（圖7）

磷脂類洗滌劑

OOPO

O

O

N

哦

O

溶血磷脂酰堿

P OO

O

O

N

Fos堿12

二己酰磷脂酰堿

圖7

溶血磷脂與天然磷脂相似，其中

膜蛋白被嵌入；它們有磷脂樣

然而，頭群的疏水尾部只含有一個

酰基鏈，它們形成水溶性聚集體事實上，有些

GPCR在提取到溶血磷脂中后仍保持功能-

細胞（68-70）溶血磷脂也被用于核磁共振結構

膜蛋白的研究以及在純化

囊性纖維化跨膜電導調節劑（CFTR）（71，72）As

前面提到過，Fos堿清潔劑已經成功-

短鏈NMR在膜蛋白研究中的成功應用（14-16）

磷脂如二己酰磷脂酰堿（DHPC），

已被用于溶解和重建整體膜

蛋白質這些化合物在溶液中形成水溶性膠束

并已被證明能維持天然蛋白質結構和功能-

當用于膜蛋白純化方案時（73，75）對于

例如，大腸桿菌外膜蛋白X的NMR結構

（OmpX）在DHPC膠束中測定（76）

膜蛋白也可以重組成洗滌劑脂質

混合膠束這可能是具代表性的雙層-

模擬系統例如，細菌視紫紅質已經被重新折疊

進入幾種不同的洗滌劑脂質系統，包括CHAPS/DMPC

和CHAPSO/SDS/DMPC膠束（77，78

實際考慮

使用時需要考慮幾個實際問題

洗滌劑和膜蛋白首先，必須確定

特定ap所需的洗滌劑純度和均勻度-

例如當純化和/或結晶蛋白質時，

人們可以選擇既純又無污染的洗滌劑-

氯化醇、酰胺或合成的其他副產物）和

同質的（即由單一物種組成）許多工業

等級洗滌劑，包括Triton和Tween，可能是純的，但

聚氧乙烯鏈組成的不均勻性

這些洗滌劑可能不太適合用于結晶篩，但是

可能足以提取蛋白質

其次，當測定增溶劑的分子量時

膜蛋白，必須考慮聚集分子

洗滌劑蛋白復合物的重量（圖8）如果可以

假設每個膠束有一個蛋白質分子，如果

蛋白質比膠束小，則

復合物等于蛋白質分子量加上膠束

聚集重量然而，較大的膜蛋白將傾向于

與比存在于

單獨的游離膠束在這種情況下，洗滌劑的濃度必須

足以全覆蓋反式-

膜結構域

蛋白質/洗滌劑復合物的聚合分子量

圖8

同樣，重要的是要注意，當一個人集中注意力時

洗滌劑溶解蛋白質的溶液，空的濃度

膠束也可能隨著其分子量的增加而增加

比集中器膜的分子量截斷值Sev-

有幾種方法可以測定so中洗滌劑的濃度-

溶液包括比色測定法（79）、薄層色譜法（80），

折射率測量（81），

和分析超速離心（82，83）其中一些方法是

可用于測定solu中游離洗滌劑的濃度-

tion（79-81）其他可用于測定蛋白質的量-

結合洗滌劑（79，80，83）或蛋白質-洗滌劑復合物的大小（81，83）

非洗滌劑表面活性劑和其他新型洗滌劑

如前所述，膜蛋白可能不穩定

或被某些洗滌劑變性，包括離子洗滌劑和

短鏈非離子洗滌劑半氟化表面活性劑（圖

9A）和兩性（圖9B）是兩種非常不同的非洗滌劑

用于膜蛋白研究的表面活性劑

 

 recipe代  recipe代 recipe代  recipe北京試劑 recipe天津試劑   recipe上海試劑  recipe代廣東試劑 recipe 代南京試劑  recipe代湖北試劑 recipe代湖南試劑  recipe代黑龍江試劑  recipe代吉林試劑  recipe代上海試劑 recipe代廣州試劑  recipe系列全  recipe系列全  recipe系列全  recipe降價 recipe其他試劑  recipe其他試劑  recipe降價  recipe降價  recipe降價  recipe活動價  recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe活動價 recipe降價 recipe降價 recipe降價 recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe試劑  recipe北京現貨  recipe天津現貨 recipe河北現貨  recipe河南現貨 recipe廣東現貨 recipe廣州現貨 recipe上海現貨 recipe湖北現貨 recipe湖南現貨 recipe內蒙古現貨 recipe山西現貨 recipe山東現貨，618周年慶， recipe降價 recipe降價 recipe降價，歡迎選購  recipe 湖北試劑  recipe 湖北試劑

以下Anatrace系列，一直現貨，價格美麗，Anatrace擁有很多忠實用戶 Anatrace擁有很多忠實用戶 Anatrace擁有很多忠實用戶 Anatrace選購 Anatrace選購 Anatrace選購

Anatrace現貨 大力回饋新老客戶，現貨打折出售，現有品牌和種類，新老客戶可以自由選購： Anatrace北京試劑 Anatrace常見問題與解答  Anatrace上海試劑 Anatrace試劑  Anatrace廣東試劑 Anatrace深圳試劑 Anatrace河北試劑 Anatrace上海試劑 Anatrace上海試劑  Anatrace安徽試劑  Anatrace河南試劑 tissue.Transnetyx天津試劑 Anatrace代理， Anatrace上海試劑 Anatrace廣東試劑 Anatrace廣州試劑 Anatrace深圳試劑 Anatrace內蒙古試劑 Anatrace河南試劑 Anatrace江蘇試劑 Anatrace江西試劑 Anatrace湖北試劑 Anatrace湖南試劑 Anatrace安徽試劑 Anatrace蘇州試劑 Anatrace杭州試劑 Anatrace浙江試劑 Anatrace南昌試劑 Anatrace北京試劑 Anatrace天津試劑 Anatrace遼寧試劑 Anatrace寧夏試劑 Anatrace深圳試劑   ANATRACE制劑存儲  Anatrace江蘇試劑   Anatrace浙江試劑    Anatrace江蘇試劑   Anatrace江蘇試劑  Anatrace廣州試劑 Anatrace試劑選購 Anatrace試劑選購