詳細介紹
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)產(chǎn)品描述
細胞凋亡(Apoptosis)的一個顯著特點是細胞染色體DNA的降解,在一些內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶的作用下,核小體間的DNA被切斷,從而產(chǎn)生不同長度的寡聚核小體片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)特異的180-200 bp DNA Ladder圖譜,而壞死細胞的DNA呈彌漫的連續(xù)圖譜。
美侖一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)采用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling)方法,其原理為:末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細胞斷裂DNA的3´-羥基(3´-OH)末端催化摻入四甲基羅丹明-脫氧三磷酸尿苷(TRITC-dUTP)。TRITC-dUTP標記的DNA可以用熒光顯微鏡直接觀察或者用流式細胞儀定量檢測。以50μl加樣量為標準,本試劑盒可測定20次。
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)產(chǎn)品優(yōu)勢
使用方便快捷,對于經(jīng)過固定和洗滌的組織樣本(石蠟切片、冰凍切片)和細胞樣本(貼壁細胞、懸浮細胞),只需經(jīng)過一步染色,洗滌后便可以進行凋亡檢測。
★ 本試劑盒還提供了DNase I陽性對照和Proteinase K,以便操作。
★ 靈敏度高、特異性好、檢測效果好。
對照實驗:采用某國內(nèi)TUNEL檢測試劑盒作為對照,在相同的實驗條件下,用Apoptosis Activator 2處理Hela細胞,熒光顯微鏡觀察細胞凋亡后的熒光染色狀況。
檢測結(jié)果:美侖一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒靈敏度高,染色效果更好。
保存條件
-20℃避光保存,有效期一年。
操作方法
請參考說明書。
注意事項
1.配制TUNEL檢測液之后的步驟注意避光操作。
2.若配制TUNEL檢測液操作時間較長,請將TdT Enzyme (10×)、TRITC-dUTP Labeling Mix和配好的檢測液置于冰上暫時保存。
3.需自備PBS或HBSS,抗熒光衰減封片劑(美侖貨號:MA0221或MA0222),組織固定液(美侖貨號:MA0192)或4%多聚甲醛,Triton X-100,二甲苯,無水乙醇等。
4.PBS或HBSS清洗后,為了各種反應的有效進行,請盡量除去PBS或HBSS溶液后再進行下一步反應。
5.結(jié)果分析時注意:在壞死的晚期階段或在高度增殖/代謝的組織細胞中可產(chǎn)生大量DNA,從而引起假陽性結(jié)果;而有些類型的凋亡性細胞死亡缺乏DNA斷裂或DNA裂解不*,以及細胞外的矩陣成分阻止TdT進入胞內(nèi)反應,進而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
6.為了您的安全和健康,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅用于科研