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實時熒光定量PCR儀
參考價: 128000
訂貨量: 1
具體成交價以合同協議為準
  • 產品型號
  • Thermofisher Scientific/賽默飛世爾 品牌
  • 代理商 廠商性質
  • 杭州市 所在地

訪問次數:317更新時間:2024-09-11 17:17:40

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產品簡介
產地類別 進口 價格區間 7萬-10萬
儀器種類 實時熒光定量PCR儀 應用領域 環保,生物產業,石油,制藥,綜合
實時熒光定量PCR儀是一種高度精確的實驗設備,用于在PCR過程中實時監測和定量目標DNA或RNA的濃度
產品介紹





實時熒光定量PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)儀是一種高度精確的實驗設備,用于在PCR過程中實時監測和定量目標DNA或RNA的濃度。與傳統的PCR儀器不同,實時熒光定量 PCR儀通過檢測PCR反應中的熒光信號變化,實現了對擴增產物的動態監控,從而提供了高靈敏度、高準確度的定量分析能力。這種技術廣泛應用于基因表達研究、遺傳變異分析、病原體檢測和許多其他生命科學領域。

一、實時熒光定量PCR的基本原理

1.1 PCR技術概述

PCR技術是一種用于擴增特定DNA序列的方法。其基本過程包括三個主要步驟:變性(Denaturation)、退火(Annealing)和延伸(Extension)。在這些步驟中,目標DNA被分解成單鏈,然后特異性引物與目標序列結合,再由DNA聚合酶延伸新的DNA鏈,從而復制出大量的目標DNA片段。

1.2 實時熒光定量的創新

傳統PCR技術只能在反應結束后進行產物分析,而實時熒光定量PCR技術則在PCR反應的每一個周期中實時監測熒光信號的變化。這是通過使用特定的熒光染料或探針實現的:

  • 熒光染料(如SYBR® Green):這些染料能夠結合雙鏈DNA,并在結合后發出熒光信號。熒光信號的強度與DNA的量成正比,因此可以通過測量熒光強度來推算DNA的濃度。

  • 探針技術(如TaqMan®探針):這些探針是標記了熒光染料的特異性探針,它們在PCR反應過程中與目標DNA序列結合,并在結合后釋放熒光信號。探針的使用提高了特異性和靈敏度。

二、實時熒光定量PCR儀的核心組件

2.1 光學系統

實時熒光定量 PCR儀的核心組件之一是其光學系統。該系統包括光源、濾光片和探測器。光源用于激發熒光染料或探針,濾光片則選擇性地分離激發光和發射光。探測器捕捉發射光并將其轉化為電子信號,從而測量熒光強度。這些組件的質量和性能直接影響到熒光信號的靈敏度和準確性。

2.2 熱循環模塊

熱循環模塊負責控制PCR反應中的溫度變化。PCR過程通常包括變性、退火和延伸三個步驟,每個步驟都有特定的溫度設置。高效的熱循環模塊需要快速且均勻地加熱和冷卻,以確保PCR反應的準確性和一致性。現代PCR儀通常具有快速升溫和降溫的能力,以縮短實驗時間并提高效率。

2.3 軟件系統

實時熒光定量 PCR儀配備了功能強大的數據分析軟件。該軟件用于設置實驗參數、監控實時數據、分析結果和生成報告。軟件功能包括標準曲線生成、數據歸一化、相對定量和絕對定量分析等。直觀的用戶界面和高級的數據分析功能使得操作更加簡便,數據解釋更加精準。

三、實時熒光定量PCR儀的應用領域

3.1 基因表達分析

實時熒光定量 PCR儀在基因表達分析中的應用非常廣泛。研究人員可以通過測量特定基因在不同樣品中的表達水平,了解基因在不同生物學條件下的功能和調控機制。此技術能夠提供高靈敏度和高特異性的定量數據,有助于揭示基因在細胞生物學、發育生物學和疾病研究中的作用。

3.2 遺傳變異分析

在遺傳研究中,實時熒光定量 PCR儀被用于檢測基因的變異,如單核苷酸多態性(SNP)和拷貝數變異(CNV)。這些變異與許多遺傳疾病和個體差異相關。通過高通量的實時PCR分析,研究人員能夠高效地進行大規模的基因分型和遺傳篩查。

3.3 病原體檢測

實時熒光定量 PCR儀在病原體檢測中發揮了重要作用。其高靈敏度和特異性使其能夠檢測和定量微量的病原體,如病毒、細菌和真菌。此技術廣泛應用于臨床診斷、食品安全監測、環境檢測等領域,有助于快速檢測感染源并實施控制措施。

3.4 miRNA和非編碼RNA研究

miRNA和其他非編碼RNA的定量分析是現代分子生物學研究中的一個重要領域。實時熒光定量 PCR儀能夠精確檢測這些低豐度的RNA分子,從而為了解RNA在基因調控、細胞功能和疾病機制中的作用提供數據支持。這對于研究基因表達調控和發現潛在的生物標志物具有重要意義。

四、實驗操作流程

4.1 樣品和試劑準備

在進行實時熒光定量PCR實驗前,需準備PCR反應混合物、引物、探針(如適用)和樣品。樣品的質量和試劑的配置對實驗結果至關重要,應嚴格按照實驗要求進行,以確保數據的準確性。

4.2 反應設置

將PCR反應混合物和樣品添加到PCR板中。根據實驗的需求選擇適當的反應體積和板型(如96孔板或384孔板)。將PCR板放入PCR儀的熱循環模塊中,設置實驗參數(如溫度、循環次數和熒光檢測通道),然后啟動實驗。

4.3 實驗運行

在實驗運行過程中,實時熒光定量 PCR儀會自動執行PCR反應,包括溫度循環和熒光信號檢測。儀器會在每個反應周期中實時監控熒光信號的變化,并記錄數據。

4.4 數據分析

實驗完成后,通過數據分析軟件進行數據處理。軟件提供了多種分析選項,包括標準曲線生成、相對定量、絕對定量等。用戶可以根據需要生成實驗報告,分析結果并進行可視化展示。

五、技術規格與性能參數

5.1 反應體積與板型

  • 板型: 支持多種PCR板型,如96孔板、384孔板。

  • 反應體積: 適應不同體積的PCR反應,通常從5 µL到100 µL不等。

5.2 溫控系統

  • 溫度范圍: 從4°C至100°C。

  • 溫控精度: ±0.5°C。

  • 升降溫速率: 快速升溫和降溫功能,縮短實驗時間。

5.3 光學系統

  • 檢測通道: 多通道熒光檢測,支持多種熒光染料和探針。

  • 靈敏度: 高靈敏度的熒光信號檢測能力,適用于低豐度樣品的分析。

5.4 軟件功能

  • 數據分析: 提供實時數據監控、標準曲線生成、相對定量和絕對定量分析。

  • 用戶界面: 直觀的觸摸屏操作,簡化實驗設置和數據分析。

  • 數據存儲: 支持實驗數據的存儲、管理和共享。

六、結論

實時熒光定量 PCR儀是一種強大且靈活的實驗工具,廣泛應用于基因表達分析、遺傳變異檢測、病原體識別和非編碼RNA研究等領域。憑借其高靈敏度的光學系統、精確的溫控功能和強大的數據分析軟件,實時熒光定量 PCR儀能夠提供高質量的定量數據,為科學研究和臨床診斷提供了可靠的支持。隨著技術的不斷進步,實時熒光定量 PCR儀將繼續在分子生物學研究中發揮重要作用。





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