Thermo Scientific細胞表面蛋白分離試劑盒是能夠方便地進行化并分離細胞表面蛋白的試劑盒,該試劑盒特異性地針對細胞表面蛋白,能有效地排除胞內蛋白的干擾。該試劑盒能夠高效地標記一些具有賴氨酸并且充分暴露在胞外的蛋白。在該分離方法中使用了一種不可透過細胞膜的,可切除的化試劑( Sulfo-NHS-SS-Biotin)來標記細胞表面蛋白暴露在外的伯胺。接下來收集并裂解細胞,使用Thermo Scientific中性親和素瓊脂糖樹脂對標記的細胞表面蛋白進行親和純化。在這樣分離的細胞表面蛋白的伯胺上僅殘留有小的、無反應活性、非化的標簽(仍然結合在樹脂上)。
產品特點:
- 分離細胞表面蛋白 – 降低全細胞蛋白的復雜性。
- 高效回收標記的蛋白 – 使用可切除的可得到接近99%的細胞表面蛋白的回收率。
- 方便 – 試劑盒提供實驗所需的所有試劑,還提供標記、細胞裂解和純化細胞表面膜蛋白的完整說明。
- 可用于蛋白免疫印跡 – 利用SDS-PAGE緩沖液回收的蛋白可直接進行聚丙烯酰胺凝膠電泳。
- 穩(wěn)定可靠 – 實驗方案適用于NIH 3T3、HeLa、C6及A431等多種細胞。
特異針對細胞表面蛋白的分離方法。圖片所示是針對細胞表面蛋白(圖A)和胞內蛋白(圖B)分別進行蛋白質免疫印跡的結果,樣品是利用細胞表面蛋白分離試劑盒處理HeLa細胞所得。加號(+)代表利用Sulfo-NHSSS-Biotin 試劑處理過的細胞的結果;減號(-)代表不用試劑處理但是其他步驟仍按試劑盒的方法進行的細胞的結果。泳道分別是無樣品樹脂對照(R),穿柱液(F)及洗脫組分(E)。目標細胞表面蛋白在加號E組分和負號F組分中出現表明使用該試劑盒成功地分離了目標蛋白。胞內蛋白在加號和減號的F組中均出現了表明標記和純化都是專一的針對細胞表面蛋白的。
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