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通用 RT-PCR 試劑盒(AMV)
貨號:RP1200
規(guī)格:50T/100T
保存:-20℃保存,避免反復(fù)凍融,復(fù)檢期為 1 年。
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑盒組成 | 50 次 | 100 次 |
AMV(10U/ul) | 50ul | 100ul |
10×AMV Buffer | 100ul | 200ul |
Oligo(dT) 16 (10uM) | 100ul | 200ul |
DTT(200mM) | 75ul | 150ul |
RNasin(40U/ul) | 25ul | 50ul |
dNTPs(10mM) | 100ul | 200ul |
Taq Polymerase(5U/ul) | 25ul | 50ul |
10×PCR Buffer | 250ul | 500ul |
MgCl 2 (25mM) | 200ul | 500ul |
RNase-free ddH 2 O | 1ml | 2ml |
說明書 | 1份 | 1份 |
產(chǎn)品簡介:
本試劑盒適用于各種 RNA 制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的 PCR 擴(kuò)增。它采用 AMV 進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),能夠獲得更長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時,在 20ul 反轉(zhuǎn)錄體系和 50ul PCR 反應(yīng)體系中,還可以一次性得到足夠量的 PCR 產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實驗。
本試劑盒中配置的酶均為進(jìn)口的酶。RT 酶采用進(jìn)口的 AMV,所以 cDNA 更長,基因的信息保留得更完整! 反轉(zhuǎn)錄過程中特異的 RNase 抑制劑可有效降低由于外源 RNase 污染而導(dǎo)致實驗失敗的風(fēng)險。 本試劑盒使用方便、快捷,可廣泛用于 cDNA 克隆及目的基因檢測等分子生物學(xué)實驗。
操作步驟:
一、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
1、在冰浴的無 RNase 的離心管中加入如下反應(yīng)成分:
2-5ug 總 RNA 或 50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT) 16 或 2 pmole基因特異性引物
補(bǔ)RNase-free ddH 2 O 14.5ul
2、65℃保溫 5min 后迅速在冰上冷卻 2min,簡短離心收集反應(yīng)液后加入以下各組分:
2ul 10×AMV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul RNasin
1ul AMV
1ul DTT
3、42℃溫浴 60min,如果是用隨機(jī)引物,請先將離心管置 25℃溫浴 10min,再 42℃溫浴 60min。
4、95℃加熱 5min 終止反應(yīng),置冰上進(jìn)行后續(xù)實驗或-20℃保存。
二、PCR 反應(yīng)
1、按以下各組分配制 50ul PCR 反應(yīng)體系:
10×PCR Buffer 5ul
MgCl 2 4ul
dNTPs 1ul
上游引物(用戶自備 10um) 1ul
下游引物(用戶自備 10um) 1ul
RT 反應(yīng)產(chǎn)物 1-2ul
Taq Polymerase 0.5ul
ddH 2 O x ul
Total Volume 50ul
2、混勻后短暫離心,PCR 儀擴(kuò)增,瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。
注意事項:
1、 用于 cDNA 合成反應(yīng)的相關(guān)試劑和耗材盡可能用 DEPC 進(jìn)行處理,并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時,首先用經(jīng)過滅菌的器具、水等配制溶液后,再將溶液進(jìn)行過濾除菌處理。
2、 RNA 樣品要避免反復(fù)多次凍融,應(yīng)使 RNA 在冰浴中處于融化狀態(tài)。
相關(guān)產(chǎn)品:
R1600 DEPC 處理水
SR0060 液相 RNase 清除劑
R1200 總 RNA 提取試劑盒
SR0080 RNAsaver RNA 長效保存液
R1050 5×RNA Loading Buffer
RP1100 通用 RT-PCR 試劑盒(M-MLV)
PC2440 Random
PC2450 Oligo T16
D1020 10×DNA 上樣緩沖液
T1060 50×TAE 緩沖液
通用 RT-PCR 試劑盒(AMV)訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
通用 RT-PCR 試劑盒(AMV)運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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