詳細(xì)介紹
食品分析用
α-葡萄糖苷酶活性抑制檢測試劑盒
淀粉分解產(chǎn)生二糖,α-葡萄糖苷酶能分解二糖產(chǎn)生葡萄糖,使血液中的血糖升高。因此,可通過抑制α-葡萄糖苷酶來抑制血糖升高。
近來有研究表明從不同的植物體中可以檢測到α-葡萄糖苷酶抑制物質(zhì),研究人員致力于將其應(yīng)用到抑制血糖升高功能性食品的研究。
α-葡萄糖苷酶活性抑制檢測試劑盒能測定對α-葡萄糖苷酶的抑制作用。與LabAssay™ 葡萄糖(血糖)檢測試劑盒配套使用,可用于檢測食品等成分中對α-葡萄糖苷酶活性抑制作用。
◆試劑盒組成
試劑名稱 | 容量 | 數(shù)量 | 主要成分 |
酶試劑 | 1 mL | 2 | α-葡萄糖苷酶 |
緩沖劑 | 50 mL用 | 2 | 馬來酸/順丁烯二酸二鈉 |
基質(zhì)液1 | 20 mL用 | 2 | D-(+)-麥芽糖 |
基質(zhì)液2 | 20 mL用 | 2 | 蔗糖 |
陽性對照 | 100 mg | 1 | 阿卡波糖 |
*阿卡波糖是一種新型口服降糖藥。在腸道內(nèi)競爭性抑制葡萄糖苷水解酶。降低多糖及蔗糖分解成葡萄糖,使糖的吸收相應(yīng)減緩,因此可具有使飯后血糖降低的作用。
◆除試劑盒外所需器具、器材
● LabAssay™ 葡萄糖(血糖)檢測試劑盒
● 96孔透明微孔板
● 酶標(biāo)儀(505 nm吸光度)
● 微量移液管
● 恒溫槽(37℃)
◆實驗操作流程
◆檢測步驟
Ⅰ.配制試劑
決定稀釋倍數(shù)的預(yù)實驗
麥芽糖 | 蔗糖 | |
基質(zhì)溶液 | 麥芽糖溶液 50 μL | 蔗糖溶液 50 μL |
純凈水 | 25 μL | |
37℃,3分鐘 |
(葡萄糖定量)
1.6孔微孔板中分別加入100 μL的酶反應(yīng)液和稀釋的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(濃度:15,10,5,2.5 mg/dl)添加150 μL LabAssay™ Glucose顯色劑,充分混合。
2.37℃下進(jìn)行10分鐘溫育,測定505 nm的吸光度。
3.麥芽糖的葡萄糖生成量為10 mg/dL,蔗糖為5 mg/dL,以此求稀釋倍率。
Ⅱ.正式試驗(酶反應(yīng))
<樣品配制>
麥芽糖 | 蔗糖 | |
基質(zhì)溶液 | 麥芽糖溶液 50 μL | 蔗糖溶液 50 μL |
樣品溶液或陽性對照溶液 | 25 μL | |
37℃,3分鐘 | ||
酶稀釋液 | 酶稀釋液25 μL(根據(jù)預(yù)實驗決定稀釋倍數(shù)) | 酶稀釋液25 μL(根據(jù)預(yù)實驗決定稀釋倍數(shù)) |
攪拌后,37℃下,準(zhǔn)確反應(yīng)30分鐘 | ||
純凈水 | 400 μL | |
立即在沸水中加熱3分鐘后,冷卻 |
<空白對照配制>
麥芽糖 | 蔗糖 | |
基質(zhì)溶液 | 麥芽糖溶液 50 μL | 蔗糖溶液 50 μL |
樣品溶液或純凈水 | 25 μL | |
純凈水 | 400 μL | |
酶稀釋液 | 酶稀釋液25 μL(根據(jù)預(yù)實驗決定稀釋倍數(shù)) | 酶稀釋液25 μL(根據(jù)預(yù)實驗決定稀釋倍數(shù)) |
立即在沸水中加熱3分鐘,冷卻 |
Ⅲ.葡萄糖定量
→同預(yù)試驗,使用LabAssay™ 葡萄糖(血糖)檢測試劑盒測定。
Ⅳ.IC50計算
1.以對照溶液的葡萄糖生成量為α-葡萄糖苷酶的100%活性,通過各濃度樣品溶液的葡萄糖生成量,求α-葡萄糖苷酶比活性;
2.以樣品或陽性對照溶液濃度(酶反應(yīng)液中的終濃度)為橫軸,以α-葡萄糖苷酶比活性為縱軸繪制半對數(shù)線圖,從得出的近似曲線算出比活性50%時樣品的濃度(IC50值)。
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 包裝 |
297-78601 | α-葡萄糖苷酶活性抑制檢測試劑盒 | 食品分析用 | 96次用 |
298-65701 | LabAssay™ 葡萄糖檢測試劑盒 | 細(xì)胞生物學(xué)用 | 1,000次用 |
194-17841 | Salacinol標(biāo)準(zhǔn)品,合成品 | 食品分析用 | 5 mg |
043-24931 | 1- 1-脫氧野尻霉素 | 生化學(xué)用 | 10 mg |
020-12631 | N-丁基-1-脫氧野尻霉素 | 生化學(xué)用 | 10 mg |
229-01891 | Voglibose | 藥理研究用 | 10 mg |
138-16221 | 米格列醇 | 藥理研究用 | 10 mg |
134-16223 | 米格列醇 | 藥理研究用 | 100 mg |